胰蛋白酶，作為絲氨酸蛋白酶家族的一部分，是一種肽鏈內(nèi)切酶，能夠在賴氨酸和精氨酸的C端精確切割肽鏈。這種生物原材料在生物制品的生產(chǎn)過程中具有廣泛的應用價值。在細胞培養(yǎng)過程中，胰蛋白酶可分解細胞間的粘蛋白和糖蛋白，使得細胞之間能夠彼此分離，從而順利進行傳代培養(yǎng)；在病毒類疫苗的生產(chǎn)過程中，在病毒培養(yǎng)階段加入適量胰蛋白酶，以促使病毒抗原暴露并與細胞受體結(jié)合，從而提高了病毒感染效率；在重組蛋白制品的生產(chǎn)中，如重組胰島素的生產(chǎn)，胰蛋白酶也被用作剪切酶，將胰島素原轉(zhuǎn)化為具有生物活性的胰島素，這不僅提高了胰島素的產(chǎn)量，而且保證了胰島素的生物活性。

   當前使用較廣泛的胰酶是從動物胰臟浸出液中提純凍干后制備而成的，其原料主要來自豬或牛的胰臟。盡管動物源胰酶制備過程中采用了適當?shù)募兓に?，但由于動物本身可能攜帶多種病毒，如瘋牛病病毒、朊病毒、豬瘟病毒等，加上受到制備工藝、生物原材料的特性和當前檢測手段的限制，動物源胰酶存在較高的外源病毒污染風險，可能對生物制品的安全性造成影響。使用重組生物原料替代動物源原料是生物制品生產(chǎn)的主要安全和風險控制手段，中國藥典2020版也收錄了重組胰蛋白酶的質(zhì)量標準，并且隨著DNA重組技術(shù)的不斷發(fā)展，生物技術(shù)藥物優(yōu)勢越來越明顯，對重組胰蛋白酶的需求也將不斷增加，據(jù)廣州恒州誠思信息咨詢有限公司發(fā)布的《2022年全球及中國重組胰蛋白酶行業(yè)頭部企業(yè)市場占有率及排名調(diào)研報告》顯示，2021年中國重組胰蛋白酶市場銷售收入達到了651萬美元，預計2028年可以達到1137萬美元，2022-2028期間年復合增長率(CAGR)為8.22%。

監(jiān)管相關(guān)文件及政策

   國家藥監(jiān)局于2019年9月發(fā)布了《疫苗上市后生產(chǎn)工藝變更研究技術(shù)指導原則》（征求意見稿），如果疫苗生產(chǎn)要進行符合藥典標準的原輔料變更，只需備案，即通過變更流程的簡化，鼓勵企業(yè)進行無動物源性原輔料的變更。

   中國藥典2020版三部“生物制品病毒安全性控制”章節(jié)中明確指出：“原材料及輔料應符合‘生物制品生產(chǎn)用原材料及輔料質(zhì)量控制’的相應要求，應盡可能選擇無病毒安全性風險或低風險的原材料和輔料用于生物制品生產(chǎn)，如選擇采用重組技術(shù)生產(chǎn)的生物材料替代動物源性生物材料”，并增加了重組胰蛋白酶的質(zhì)量標準（中國藥典2020年版3603）。相關(guān)實驗數(shù)據(jù)

圖1 .無動物成分的rTrypsins具有與天然Trypsin相同的細胞分離效果。

圖2A . Vero細胞形態(tài)學顯示Sheffield?rTrypsin比其他市售重組胰蛋白酶分離細胞快。

圖2B. Sheffield rTrypsin比其他市售重組胰蛋白酶解離細胞時間更短。

圖3 . Sheffield?rTrypsin和其他市售重組胰蛋白酶均未發(fā)現(xiàn)明顯毒性。

圖4 . 所有rTrypsins消化傳代后的細胞倍增水平顯示這些rTrypsins對細胞沒有明顯毒性。

    實驗結(jié)果顯示，所有的胰蛋白酶在都能有效地分離單層細胞，表明rTrypsin可以代替天然胰蛋白酶進行細胞分離(圖1 )。然而，這些被評估的胰蛋白酶都不能完全分離緊密的細胞團塊。在消化單細胞層所需的時間方面，與其它商品化rTrypsin相比，Kerry Sheffield? rTrypsin酶解速度更快(圖2A & B )。細胞毒性研究表明，所有市售rTrypsins的細胞活率和細胞倍增時間均相近，表明重組胰蛋白酶對細胞無明顯毒性(圖3、4 )。

Kerry Sheffield?rTrypsin ACF重組胰蛋白酶的優(yōu)點：

• 安全：無動物源成分，避免了外源病毒污染風險，保障了生物安全性。
• 高效：多種細胞類型適用，且消化效率高、溫和，不傷細胞，提高細胞培養(yǎng)效率和成功率。
• 穩(wěn)定：基因序列來自微生物胰酶，室溫放置一個月不會降低活性，穩(wěn)定性強。
• 簡便：實驗操作簡便，無需洗細胞表面和添加胰酶抑制劑，節(jié)省時間提高效率。

Kerry Sheffield?rTrypsin ACF產(chǎn)品列表

免費試用申請

為了滿足廣大客戶的需求，Sheffield? rTrypsin ACF免費試用活動已開啟，即日起至2023年12月31日，關(guān)注“西美杰微信公眾號（微信號xmjsci）”，發(fā)送關(guān)鍵詞“重組胰酶”，填寫試用調(diào)查問卷即可獲得免費試用機會，數(shù)量有限，先到先得。

美國Kerry集團旗下Sheffield Bio-Science服務于全球超過70年，作為全球生物制藥疫苗行業(yè)規(guī)模大專業(yè)性強的細胞營養(yǎng)原料供應商，已成為全球單個藥物年銷售額超過10億美金的10個“生物炸彈藥”中7個生物藥的培養(yǎng)基原料供應商，是全球少有的同時生產(chǎn)酵母粉和蛋白胨并針對不同細胞株/菌種開發(fā)提供非動物源性復合添加物系統(tǒng)的生產(chǎn)商，引領全球制藥、疫苗、無血清培養(yǎng)基、傳統(tǒng)發(fā)酵和診斷培養(yǎng)基工業(yè)的發(fā)展。

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